הכנת דוגמא וטְעִינָה
בשל השימוש במערכת חיץ רציפה ללא ג'ל הערימה ברוב המקרים, הדגימות צריכות להיות בריכוז מתאים ובנפח קטן. השתמש באפִּיפֵּטָהלהוסיף לאט את המדגם, עם 5-10 מיקרוגרם לבאר, כדי למנוע ירידה משמעותית ברזולוציה. כַּאֲשֵׁרטעינת מדגם, יש לכבות את אספקת החשמל. הדגימה צריכה להכיל צבע אינדיקטור (0.025% ברומופנול כחול או כתום) וסוכרוז (10-15%) או גליצרול (5-10%) כדי להגביר את צפיפותו, לרכז את הדגימה ולמנוע דיפוזיה. עם זאת, לפעמים סוכרוז או גליצרול עלולים לגרום לרצועות בצורת U בתוצאות אלקטרופורזה, מהן ניתן להימנע על ידי שימוש ב-2.5% Ficoll (פוליווינילפירולידון).
אלקטרופורזה
המתח לאלקטרופורזה הוא 5-15 V/cm, בדרך כלל סביב 10 V/cm. להפרדה של מולקולות גדולות, המתח צריך להיות נמוך יותר, בדרך כלל לא יעלה על 5 V/cm.
הַכתָמָה
צבע פלואורסצנטי אתידיום ברומיד (EB) משמש בדרך כלל לצביעה כדי לצפות ברצועות DNA בג'ל אגרוז. EB יכול להחדיר בין זוגות בסיסים של מולקולות DNA, מה שגורם ל-EB להיקשר ל-DNA. הספיגה של אור אולטרה סגול של 260 ננומטר על ידי DNA מועברת ל-EB, וה-EB הקשור פולט פלואורסצנטי ב-590 ננומטר באזור האדום-כתום של ספקטרום האור הנראה. צביעת הג'ל בתמיסת MgSO4 של 1 mmol/L למשך שעה יכולה להפחית את הקרינה הרקע הנגרמת על ידי EB לא קשור, מה שמקל על זיהוי כמויות קטנות של DNA.
לצבע EB מספר יתרונות: הוא קל לשימוש, אינו שובר חומצות גרעין, בעל רגישות גבוהה ויכול לצבוע גם DNA וגם RNA. ניתן להוסיף EB לדגימה ולעקוב אחריה באמצעות ספיגת UV בכל עת. לאחר צביעה, ניתן להסיר EB על ידי מיצוי עם n-butanol.
עם זאת, צבע EB הוא מוטגן חזק, ויש לנקוט באמצעי זהירות, כגון לבישת כפפות פוליאתילן, במהלך הטיפול. אקרידין כתום הוא גם צבע נפוץ מכיוון שהוא יכול להבדיל בין חומצות גרעין חד-גדיליות לדו-גדיליות (DNA, RNA). הוא מציג קרינה ירוקה (530 ננומטר) עבור חומצות גרעין דו-גדיליות ופלורסנטיות אדומה (640 ננומטר) עבור חומצות גרעין חד-גדיליות. בנוסף, ניתן להשתמש בצבעים אחרים כגון מתילן כחול, ירוק מתילן וקינולין B לצביעה.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) מתמחה בייצור מכשירי אלקטרופורזה כבר יותר מ-50 שנה עם צוות טכני ומרכז מו"פ מקצועי משלנו. יש לנו קו ייצור אמין ושלם מתכנון ועד בדיקה, ומחסן, כמו גם תמיכה שיווקית. המוצרים העיקריים שלנו הם תא אלקטרופורזה (טנק/תא), אספקת חשמל אלקטרופורזה, תאורת LED כחולה, תאורת UV, מערכת תמונה וניתוח ג'ל וכו'.
אנו מחפשים כעת שותפים, גם מיכל אלקטרופורזה OEM וגם מפיצים יתקבלו בברכה.
אם יש לך תוכנית רכישה כלשהי עבור המוצרים שלנו, אנא אל תהסס לפנות אלינו. אתה יכול לשלוח לנו הודעה במייל[מוגן באימייל]אוֹ[מוגן באימייל], או נא להתקשר אלינו בטלפון +86 15810650221 או הוסף Whatsapp +86 15810650221, או Wechat: 15810650221.
אנא סרוק את קוד ה-QR כדי להוסיף ב-Whatsapp או WeChat.
זמן פרסום: 20 בדצמבר 2023