Assay Comet (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) היא טכניקה רגישה ומהירה המשמשת בעיקר לאיתור נזק ל-DNA ותיקון בתאים בודדים. השם "בדיקת שביט" מגיע מהצורה האופיינית דמוית השביט המופיעה בתוצאות: גרעין התא יוצר את ה"ראש", בעוד שברי ה-DNA הפגועים נודדים ויוצרים "זנב" הדומה לשביט.
עִקָרוֹן
העיקרון של מבחן השביט מבוסס על נדידה של שברי DNA בשדה חשמלי. DNA שלם נשאר בתוך גרעין התא, בעוד DNA פגום או מקוטע נודד לעבר האנודה ויוצר את "זנב השביט". אורך ועוצמת הזנב עומדים ביחס ישר למידת הנזק של ה-DNA.
נוֹהָל
- הכנת תאים: תאים שייבדקו מעורבבים עם אגרוז בנקודת התכה נמוכה ומורחים על שקופיות מיקרוסקופ ליצירת שכבה אחידה.
- ליזה של תאים: השקופיות טובלות בתמיסת תמוגה כדי להסיר את קרום התא והממברנה הגרעינית, תוך חשיפת ה-DNA.
- אלקטרופורזה: השקופיות ממוקמות בתא אלקטרופורזה בתנאים בסיסיים או ניטרליים. שברי DNA פגומים נודדים לעבר האלקטרודה החיובית בהשפעת השדה החשמלי.
- הַכתָמָה: לאחר אלקטרופורזה, השקופיות מוכתמות בצבע ניאון (למשל, אתידיום ברומיד) כדי לדמיין את ה-DNA.
- ניתוח מיקרוסקופי: באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי או תוכנה מיוחדת, צורות השביט מנותחות, ומדידות פרמטרים כמו אורך ועוצמת הזנב.
תמונה מ-biorender
ניתוח נתונים
תוצאות מבדיקת Comet מוערכות על סמך מספר פרמטרים מרכזיים:
- אורך הזנב: מייצג את המרחק שה-DNA נודד, המציין את מידת הנזק ל-DNA.
- תוכן DNA זנב: אחוז ה-DNA הנודד לזנב, משמש לעתים קרובות כמדד כמותי לנזק ל-DNA.
- רגע זנב זית (OTM): משלב גם את אורך הזנב וגם את תכולת ה-DNA בזנב כדי לספק מדד מקיף יותר של נזק ל-DNA.
יישומים
- מחקרים על גנוטוקסיות: מבחן השביט נמצא בשימוש נרחב להערכת ההשפעות של כימיקלים, תרופות וקרינה על ה-DNA של התא, מה שהופך אותו לכלי מפתח לבדיקת גנוטוקסיות.
- טוקסיקולוגיה סביבתית: זה עוזר בניתוח ההשפעה של מזהמים סביבתיים על ה-DNA של אורגניזמים, ומספק תובנות לגבי בטיחות המערכת האקולוגית.
- מחקר רפואי וקליני: מבחן השביט משמש בחקר מנגנוני תיקון DNA, סרטן ומחלות אחרות הקשורות ל-DNA. זה גם מעריך את ההשפעה של טיפולים בסרטן כמו הקרנות וכימותרפיה על ה-DNA.
- מדעי המזון והחקלאות: משמש להערכת בטיחותם של חומרי הדברה, תוספי מזון וחומרים אחרים, ולחקור את ההשפעות הרעילות שלהם במודלים של בעלי חיים.
יתרונות
- רגישות גבוהה: מסוגל לזהות רמות נמוכות של נזק ל-DNA.
- הפעלה פשוטה: הטכניקה פשוטה, מה שהופך אותה למתאימה להקרנה בתפוקה גבוהה.
- יישום רחב: ניתן ליישם אותו על סוגי תאים שונים, כולל תאי בעלי חיים וצמחים.
- אתגרי כימות: למרות מתן נתונים איכותיים על נזקי DNA, ניתוח כמותי מסתמך במידה רבה על תוכנה וטכניקות ניתוח תמונה.
- תנאי ניסוי: התוצאות יכולות להיות מושפעות מגורמים כמו זמן אלקטרופורזה ו-pH, הדורשים בקרה קפדנית של תנאי הניסוי.
מגבלות
מבחן השביט הוא כלי שלא יסולא בפז במחקר ביו-רפואי, מדעי הסביבה ופיתוח תרופות בשל גמישותו ורגישותו הגבוהה באיתור נזקי DNA ותיקון. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology Co.)מציע תא אלקטרופורזה אופקי לבדיקת שביט. מוזמן ליצור איתנו קשר כדי לדון בנושאבדיקת שביטפּרוֹטוֹקוֹל.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) מתמחה בייצור מכשירי אלקטרופורזה כבר יותר מ-50 שנה עם צוות טכני ומרכז מו"פ מקצועי משלנו. יש לנו קו ייצור אמין ושלם מתכנון ועד בדיקה, ומחסן, כמו גם תמיכה שיווקית. המוצרים העיקריים שלנו הם תא אלקטרופורזה (טנק/תא), ספק כוח אלקטרופורזה, תאורת LED כחולה, תאורת UV, מערכת תמונה וניתוח ג'ל ועוד. אנו מספקים גם את מכשירי המעבדה כמו מכשיר PCR, מערבל מערבולת וצנטריפוגה למעבדה.
אם יש לך תוכנית רכישה כלשהי עבור המוצרים שלנו, אנא אל תהסס לפנות אלינו. אתה יכול לשלוח לנו הודעה במייל[מוגן באימייל]אוֹ[מוגן באימייל], או נא להתקשר אלינו בטלפון +86 15810650221 או הוסף Whatsapp +86 15810650221, או Wechat: 15810650221.
אנא סרוק את קוד ה-QR כדי להוסיף ב-Whatsapp או WeChat.
זמן פרסום: 20-20-2024