מיטוב אלקטרופורזה של ג'ל: שיטות עבודה מומלצות לנפח, מתח ותזמון דגימות

מָבוֹא

אלקטרופורזה של ג'ל היא טכניקה בסיסית בביולוגיה מולקולרית, בשימוש נרחב להפרדה של חלבונים, חומצות גרעין ומקרומולקולות אחרות. שליטה נכונה של נפח הדגימה, המתח וזמן האלקטרופורזה היא חיונית להשגת תוצאות מדויקות וניתנות לשחזור.עמית למעבדה שלנו מציעשיטות עבודה מומלצות לניהול פרמטרים אלו במהלך אלקטרופורזה של ג'ל SDS-PAGE.

מוצרי אלקטרופורזה ג'ל ביוטכנולוגיה בייג'ינג Liuyi

נפח דגימה: הבטחת עקביות

בעת ביצוע אלקטרופורזה של SDS-PAGE, נפח הדגימה הוא גורם מפתח שיכול להשפיע באופן משמעותי על הרזולוציה של התוצאות שלך. בדרך כלל מומלץ לטעון 10 μL של חלבון כולל לכל באר. כדי להבטיח עקביות ולמנוע דיפוזיה של מדגם בין בארות סמוכות, חשוב לטעון נפח שווה של חיץ טעינה פי 1 בכל בארות ריקות. אמצעי זהירות זה עוזר למנוע התפשטות של דגימות לנתיבים סמוכים, דבר שעלול להתרחש אם הבאר נשארת ריקה.

לפני טעינת הדגימות שלך, התחל תמיד בהוספת סמן משקל מולקולרי לבאר אחת. זה מאפשר זיהוי קל של גדלי חלבון לאחר אלקטרופורזה.

בקרת מתח: איזון מהירות ורזולוציה

המתח המופעל במהלך האלקטרופורזה משפיע ישירות הן על המהירות שבה דגימות נודדות דרך הג'ל והן על רזולוציית ההפרדה. עבור SDS-PAGE, רצוי להתחיל עם מתח נמוך בסביבות 80V. מתח נמוך ראשוני זה מאפשר לדגימות לנדוד לאט ובאופן שווה, ולרכז אותן ברצועה חדה כשהן נכנסות לג'ל המפריד.

לאחר שהדגימות נכנסו במלואן לג'ל המפריד, ניתן להגביר את המתח ל-120V. מתח גבוה זה מאיץ את הנדידה, ומבטיח שהחלבונים מופרדים ביעילות בהתאם למשקל המולקולרי שלהם. חיוני לעקוב אחר התקדמות חזית הצבע הכחול ברומופנול, המעיד על השלמת האלקטרופורזה. עבור ג'לים עם ריכוז של 10-12%, 80-90 דקות מספיקות בדרך כלל; עם זאת, עבור 15% ג'לים, ייתכן שיהיה עליך להאריך מעט את זמן הריצה.

ניהול זמן: לדעת מתי להפסיק

תזמון הוא גורם קריטי נוסף באלקטרופורזה של ג'ל. הפעלת הג'ל לתקופה ארוכה מדי או קצרה מדי עלולה להוביל להפרדה לא אופטימלית. נדידת הצבע הכחול ברומופנול היא אינדיקטור שימושי: כאשר הוא מגיע לתחתית הג'ל, זה בדרך כלל הזמן לעצור את הריצה. עבור ג'לים סטנדרטיים, כגון 10-12%, משך אלקטרופורזה של כ-80-90 דקות הוא בדרך כלל הולם. עבור אחוז ג'לים גבוה יותר, כמו 15%, יש להאריך את זמן הריצה כדי להבטיח הפרדה מלאה של חלבונים.

ניהול מאגר: שימוש חוזר והכנת מאגרים

ניתן לעשות שימוש חוזר במאגר אלקטרופורזה 1-2 פעמים, בהתאם לתנאים הספציפיים של המעבדה שלך. עם זאת, לתוצאות מיטביות, מומלץ להכין חוצץ טרי פי 10 ולדלל אותו ממש לפני השימוש. זה מבטיח שהמאגר שומר על יעילותו, מה שמוביל לתוצאות אלקטרופורזה אמינות יותר.

מוצרי אלקטרופורזה ג'ל ביוטכנולוגיה בייג'ינג Liuyi

על ידי שליטה קפדנית של נפח הדגימה, המתח וזמן האלקטרופורזה, אתה יכול לשפר משמעותית את הדיוק והשחזור של תוצאות האלקטרופורזה שלך בג'ל. יישום שיטות עבודה מומלצות אלה בעבודת המעבדה שלך יעזור לך להשיג פסים ברורים ומובחנים יותר, שיובילו לנתונים טובים יותר לניתוח במורד הזרם.

אם יש לך עוד שיטות טובות לייעל את ניסוי האלקטרופורזה בג'ל, מוזמן לדון איתנו!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) מתמחה בייצור מכשירי אלקטרופורזה כבר יותר מ-50 שנה עם צוות טכני ומרכז מו"פ מקצועי משלנו. יש לנו קו ייצור אמין ושלם מתכנון ועד בדיקה, ומחסן, כמו גם תמיכה שיווקית. המוצרים העיקריים שלנו הם תא אלקטרופורזה (טנק/תא), ספק כוח אלקטרופורזה, תאורת LED כחולה, תאורת UV, מערכת תמונה וניתוח ג'ל ועוד. אנו מספקים גם את מכשירי המעבדה כמו מכשיר PCR, מערבל מערבולת וצנטריפוגה למעבדה.

אם יש לך תוכנית רכישה כלשהי עבור המוצרים שלנו, אנא אל תהסס לפנות אלינו. אתה יכול לשלוח לנו הודעה במייל[מוגן באימייל]אוֹ[מוגן באימייל], או נא להתקשר אלינו בטלפון +86 15810650221 או הוסף Whatsapp +86 15810650221, או Wechat: 15810650221.

אנא סרוק את קוד ה-QR כדי להוסיף ב-Whatsapp או WeChat.