הכנת ג'ל אגרוז לאלקטרופורזה

הכנת ג'ל אגרוז לאלקטרופורזה

הערה: ללבוש תמיד כפפות חד פעמיות!

הוראות שלב אחר שלב

שקילת אבקת אגרוז:uזה נייר שקילה ומאזן אלקטרוני למדידת 0.3 גרם של אבקת אגרוז (מבוסס על מערכת של 30 מ"ל).

הכנת מאגר TBST:pתקן 30 מ"ל של חיץ TBST 1x בבקבוק של 100 מ"ל Erlenmeyer.

המסת אבקת אגרוז:pמכניסים את אבקת האגרוז למאגר TBST ומנערים היטב.תכניס אותםלמיקרוגל ומחממים (בדרך כלל למשך 50 שניות, מכוסה בנייר אלומיניום) עד להמסה מלאה.

קירור והוספת נוקלאז:uהשתמש בכפפות כדי להסיר את התערובת מהמיקרוגל ולתת לה להתקרר מעט במים קרים עד שהיא חמימה (כ-60 מעלות צלזיוס). הוסף 2µl של נוקלאז (תחליף Eb) תוך כדי ניעור כדי לערבב ביסודיות.

הכנת תבנית הג'ל:

• Cלהישען ולייבש אתמגש ג'ל ומכשיר ליציקת ג'לשל מיכל האלקטרופורזה.
•  Pשרוך את הג'למַגָשׁלתוך המיכל הפנימי והכנס את המסרק במצב קבוע.
• מערבבים את תמיסת הג'ל אגרוז, מקורר לכ-65 מעלות צלזיוס, ושופכים אותה בזהירות על גבימגש ג'לב-מכשיר ליציקת ג'ל, מורחים אותו באיטיות עד שיוצרת שכבת ג'ל אחידה על צלחת הזכוכית.
• הניחו לו לשבת בטמפרטורת החדר עד שהג'ל מתמצק לחלוטין.
• הסר בעדינות את המסרק בצורה אנכית והסר את הסרט.
• מניחים את הג'למַגָשׁלתוך מיכל האלקטרופורזה.

חשוב: ודא שאין בועות אוויר באזור שיני המסרק. פני הנוזל צריכים להיות חלקים ללא אדוות.

הפעלת הג'ל

טעינת הג'ל

לאחר שהג'ל מתמצק, הניחו אותו לתוך מיכל האלקטרופורזה ויוצקים את חיץ האלקטרופורזה עד שהג'ל שקוע.

הכנת דוגמאות

• קח את הסמן ומאגר הטעינה מהמקרר.
• הוסף 6µl של חיץ טעינה לדגימות וערבב היטב.
• בעזרת מיקרופיפטה, טען באיטיות את הדגימות לבארות הגדולות של הג'ל (היזהר לא לנקב את הג'ל ולא לפזר את כל הנפח כדי למנוע בועות אוויר).
• טען את הסמן לכל אחת מהבארות הקטנות (זכור את מיקומו).

התחלת אלקטרופורזה

• מכסים את מיכל האלקטרופורזה ומתחילים באלקטרופורזה מיד לאחר טעינת הג'ל.
• הגדר את המתח ל-60-100V. הדגימות ינודו מהאלקטרודה השלילית (שחורה) לאלקטרודה החיובית (אדומה).
• מתח גבוה יותר מקצר את טווח ההפרדה האפקטיבי של ג'ל agarose.
• הפסק את האלקטרופורזה כאשר הצבע הכחול ברומופנול מגיע לכ-1 ס"מ מהקצה התחתון של צלחת הג'ל.

התבוננות בתוצאות

לאחר הפרדת הרצועות יש להפסיק את האלקטרופורזה, להוציא את הג'ל ולזהות ולצלם אותו ישירות.

השתמש במערכת הדמיית ג'ל כדי לצלם ולהתבונן ברצועות (בדוק אם יש להקות לסמן או לדגימות).

לאחר השגת מפת רצועת הג'ל שלך, מצא את הסמן. בהתבסס על הסמן, אתה יכול לקבוע את רצועות היעד!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) מייצרים מוצרי אלקטרופורזה במשך יותר מ-50 שנה. אנו מציגים את מערכות האלקטרופורזה האופקית שלנו כאן עבורג'ל אגרוזאלקטרופורזה.לִבחוֹרמערכות אלקטרופורזה אופקיותמבייג'ין ליוי לניסוי האלקטרופורזה שלך בג'ל כדי לעזור למחקר שלך בתעשיית הביוטכנולוגיה.

אנו מציעים דגמים שונים של מיכלי אלקטרופורזה אופקיים ליציקה וריצה קטנהagaroseג'לים עד גדוליםagaroseג'לים

מדריך בחירה ליחידת אלקטרופורזה ג'ל טבול אופקי

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) מתמחה בייצור מכשירי אלקטרופורזה כבר יותר מ-50 שנה עם צוות טכני ומרכז מו"פ מקצועי משלנו. יש לנו קו ייצור אמין ושלם מתכנון ועד בדיקה, ומחסן, כמו גם תמיכה שיווקית. המוצרים העיקריים שלנו הם תא אלקטרופורזה (טנק/תא), ספק כוח אלקטרופורזה, תאורת LED כחולה, תאורת UV, מערכת תמונה וניתוח ג'ל ועוד. אנו מספקים גם את מכשירי המעבדה כמו מכשיר PCR, מערבל מערבולת וצנטריפוגה למעבדה.

אם יש לך תוכנית רכישה כלשהי עבור המוצרים שלנו, אנא אל תהסס לפנות אלינו. אתה יכול לשלוח לנו הודעה במייל[מוגן באימייל]אוֹ[מוגן באימייל], או נא להתקשר אלינו בטלפון +86 15810650221 או הוסף Whatsapp +86 15810650221, או Wechat: 15810650221.

אנא סרוק את קוד ה-QR כדי להוסיף ב-Whatsapp או WeChat.