Pulsed Field Gel Electrophoresis CHEF Mapper A7
מפרטים
| דֶגֶם | CHEF Mapper A7 |
| שיפוע מתח | 0.5V/cm עד 9.6V/cm, תוספת של 0.1V/cm |
| זרם מקסימלי | 0.5A |
| מתח מקסימלי | 350V |
| זווית דופק | 0-360° |
| מעבר זמן | ליניארי ולא ליניארי |
| זמן החלפה | 50 שניות עד 18 שעות |
| זמן ריצה מקסימלי | 999 שעות |
| מספר אלקטרודות | 24, בשליטה עצמאית |
| שינוי וקטור רב-מצבי | תומך בעד 10 וקטורים לכל מחזור דופק |
| טווח טמפרטורה | 0℃ עד 50℃, שגיאת זיהוי <±0.5℃ |
תֵאוּר
Pulsed Field gel electrophoresis (PFGE) מפרידה מולקולות DNA על ידי החלפת השדה החשמלי בין צמדי אלקטרודות שונים במרחב, מה שגורם למולקולות DNA, שאורכותן עשויות להיות מיליוני זוגות בסיסים, לכוון מחדש ולנדוד דרך נקבוביות ג'ל agarose במהירויות שונות. הוא משיג רזולוציה גבוהה בטווח זה ומשמש בעיקר בביולוגיה סינתטית; זיהוי שושלות ביולוגיות ומיקרוביאליות; מחקר באפידמיולוגיה מולקולרית; מחקרים של שברי פלסמיד גדולים; לוקליזציה של גנים של מחלות; מיפוי פיזי של גנים, ניתוח RFLP וטביעת אצבע של DNA; מחקר מתוכנת של מוות תאים; מחקרים על נזק ותיקון DNA; בידוד וניתוח של DNA גנומי; הפרדה של DNA כרומוזומלי; בנייה, זיהוי וניתוח של ספריות גנומיות גדולות; וריכוזי מחקר טרנסגניים נמוכים עד 0.5 ng/µL (dsDNA).
בַּקָשָׁה
מתאים לאיתור והפרדה של מולקולות DNA בגודל של 100bp עד 10Mb, תוך השגת רזולוציה גבוהה בטווח זה.
תכונה
• טכנולוגיה מתקדמת: משלב טכנולוגיות של CHEF ו-PACE פולס-שדה כדי להשיג תוצאות אופטימליות עם נתיבים ישרים שאינם מתכופפים.
• בקרה עצמאית: כולל 24 אלקטרודות פלטינה בשליטה עצמאית (קוטר 0.5 מ"מ), כאשר כל אלקטרודה ניתנת להחלפה בנפרד.
• פונקציית חישוב אוטומטי: משלבת מספר משתני מפתח כגון שיפוע מתח, טמפרטורה, זווית מיתוג, זמן התחלתי, זמן סיום, זמן מיתוג זרם, זמן ריצה כולל, מתח וזרם לחישובים אוטומטיים, ועוזר למשתמשים להשיג תנאי ניסוי אופטימליים.
• אלגוריתם ייחודי: משתמש באלגוריתם בקרת פעימה ייחודי להשפעות הפרדה טובות יותר, הבחנה בקלות בין DNA ליניארי ועגול, עם הפרדה משופרת של DNA מעגלי גדול.
• אחסון תוכניות: מאחסן עד 15 תוכניות ניסוי מורכבות, שכל אחת מהן כוללת לא פחות מ-8 מודולי תוכניות.
• שינוי וקטור רב-מצבי: תומך בעד 10 וקטורים לכל מחזור דופק, המאפשר הגדרה של כל זווית, מתח ומשך זמן.
• Transition Slope: ליניארי, קעור או קמור באמצעות פונקציות היפרבוליות.
• אוטומציה: מתעד אוטומטית ומפעיל מחדש אלקטרופורזה אם המערכת מופרעת עקב הפסקת חשמל.
• ניתן להגדרה על ידי משתמש: מאפשר למשתמשים להגדיר את התנאים שלהם.
• גמישות: המערכת יכולה לבחור שיפועים ספציפיים וזמני מיתוג עבור טווחי גודל DNA מסוימים.
• מסך גדול: מצויד במסך LCD בגודל 7 אינץ' לתפעול קל, הכולל שליטה תוכנה ייחודית לשימוש פשוט ונוח.
• זיהוי טמפרטורה: בדיקות טמפרטורה כפולות מזהות ישירות טמפרטורת חיץ עם מרווח שגיאה של פחות מ-±0.5℃.
• מערכת סירקולציה: מגיעה עם מערכת מחזור חיץ השולטת ומנטרת במדויק את טמפרטורת תמיסת החיץ, המבטיחה טמפרטורה קבועה ואיזון יוני במהלך האלקטרופורזה.
• בטיחות גבוהה: כולל כיסוי בטיחותי אקרילי שקוף שמנתק אוטומטית את החשמל בעת הרמה, יחד עם פונקציות הגנה מפני עומס יתר וללא עומס.
• פילוס מתכוונן: מיכל האלקטרופורזה וגלגלת הג'ל כוללים רגליים מתכווננות ליישור.
• עיצוב עובש: מיכל האלקטרופורזה עשוי עם מבנה תבנית משולב ללא הדבקה; מתלה האלקטרודות מצויד באלקטרודות פלטינה 0.5 מ"מ, מה שמבטיח עמידות ותוצאות ניסוי יציבות.
• זווית דופק: ניתן לבחור את זווית הדופק בחופשיות בין 0-360°, מה שמאפשר למשתמשים להשיג הפרדה יעילה החל מ-DNA כרומוזומלי גדול לפלסמיד קטן בתוך אותה מערכת.
• שיפוע זמן דופק: כולל שיפוע זמן דופק ליניארי ולא ליניארי (קמור וקעור). מעברי צבע לא ליניאריים מספקים טווח דינמי הפרדה רחב יותר, המאפשר למשתמשים לקבוע בצורה מדויקת יותר גדלי פרגמנטים.
• ניטור בזמן אמת: מציג בו זמנית פרמטרים מוגדרים ומצב תפעולי, תואם לתוכנת ניטור בזמן אמת.
• פעימות משניות: טכנולוגיית הפולסים המשנית יכולה להאיץ את שחרור ה-DNA מג'ל אגרוז, להקל על ההפרדה של שברי DNA גדולים מאוד ולשפר את הרזולוציה.
• תואם עם PulseNet China: המערכת יכולה להתממשק עם רשת ניטור הפתוגנים הלאומית ורשת הניטור PulseNet China, מה שמאפשר להבדיל מקטעים בעלי משקל מולקולרי דומה.
שאלות נפוצות
ש: מהי אלקטרופורזה של ג'ל דופק?
ת: Pulsed Field Gel Electrophoresis היא טכניקה המשמשת להפרדה של מולקולות DNA גדולות על סמך גודלן. זה כולל החלפת כיוון השדה החשמלי במטריצת ג'ל כדי לאפשר הפרדה של שברי DNA גדולים מכדי להיפתר על ידי אלקטרופורזה מסורתית של ג'ל אגרוז.
ש: מהם היישומים של Pulsed Field Gel Electrophoresis?
ת: אלקטרופורזה של ג'ל דופק בשדה נמצא בשימוש נרחב בביולוגיה מולקולרית ובגנטיקה עבור:
• מיפוי של מולקולות DNA גדולות, כגון כרומוזומים ופלסמידים.
• קביעת גדלי הגנום.
• לימוד וריאציות גנטיות וקשרים אבולוציוניים.
• אפידמיולוגיה מולקולרית, במיוחד למעקב אחר התפרצויות מחלות זיהומיות.
• ניתוח נזק ותיקון DNA.
• קביעת נוכחותם של גנים ספציפיים או רצפי DNA.
ש: כיצד פועלת אלקטרופורזה של ג'ל Pulsed Field?
ת: אלקטרופורזה של ג'ל פועם בשדה פועל על ידי הכפפת מולקולות DNA לשדה חשמלי פועם שמתחלף בכיוון. זה מאפשר למולקולות DNA גדולות לכוון את עצמן מחדש בין הפולסים, מה שמאפשר את תנועתן דרך מטריצת הג'ל. מולקולות DNA קטנות יותר נעות מהר יותר דרך הג'ל, בעוד שגדולות יותר נעות לאט יותר, מה שמאפשר את ההפרדה שלהן על סמך הגודל.
ש: מהו העיקרון מאחורי אלקטרופורזה של ג'ל Pulsed Field?
ת: Electrophoresis של ג'ל שדה פועם מפרידה מולקולות DNA בהתבסס על גודלן על ידי שליטה על משך וכיוון פעימות השדה החשמלי. השדה המתחלף גורם למולקולות DNA גדולות לכוון את עצמן מחדש ללא הרף, מה שמוביל להגירה שלהן דרך מטריצת הג'ל ולהפרדה בהתאם לגודל.
ש: מהם היתרונות של אלקטרופורזה של ג'ל דופק?
ת: רזולוציה גבוהה להפרדת מולקולות דנ"א גדולות עד כמה מיליוני זוגות בסיסים. יכולת זיהוי והבחנה של קטעי DNA בגדלים דומים. רבגוניות ביישום, החל מהקלדה מיקרוביאלית ועד גנטיקה מולקולרית וגנומיקה. שיטה מבוססת למחקרים אפידמיולוגיים ומיפוי גנטי.
ש: איזה ציוד דרוש לאלקטרופורזה של ג'ל פועם?
ת: אלקטרופורזה של ג'ל פועם בשדה מצריכה בדרך כלל מנגנון אלקטרופורזה עם אלקטרודות מיוחדות להפקת שדות פולסים. מטריצת ג'ל אגרוז עם ריכוז ומאגר מתאים. ספק כוח המסוגל לייצר פולסים במתח גבוה.מערכת קירור לפיזור חום שנוצר בזמן אלקטרופורזה, ומשאבת מחזור.
